Fortalecimiento de las capacidades de diagnóstico e investigación del Laboratorio de Salud Pública de la Facultad de Ciencias Exactas (UNLP), integrado a la red de diagnóstico de SARS-CoV-2 de la Provincia de Buenos Aires

After the first COVID-19 case was reported in China in December 2019, leading to a sanitary crisis and later expanded to a pandemic, Public Health Systems were forced to adapt their facilities and capabilities to face, among other actions, the need for massive diagnostics, surveillance, monitoring immune response and assess protection post-infection and, eventually, after vaccination. In this scenario, many researchers, professionals, recent graduates and students at the School of Sciences (Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata) assembled a multisdiciplinary team called “Grupo COVID Exactas”. This group helped to set up a facility to perform routine RT-qPCR-based detection of viral RNA in clinical samples at the Laboratory of Public Health of the Secretary of Extension of the Faculty (Secretaría de Extensión de la Facultad de Ciencias Exactas de la Universidad Nacional de La Plata).To cope with the shortage of reagents worldwide and to simplify RNA isolation, a silica-coated magnetic bead-based system was developed locally to avoid centrifugation steps. At the same time, the serology group initiated specific IgG screening tests, and the research team addressed the development of immunoassays to detect SARS-CoV-2-specific IgG/IgM/IgA. Also, urine infrared and fluorescence spectra are being explored for their potential to find differential patterns associated with the disease. The seriousness of the public health problem led the signature of a cooperation agreement between the UNLP and the Ministry of Health of the Province of Buenos Aires (Ministerio de Salud de la Provincia de Buenos Aires) to update the laboratory setups, to coordinate distribution of clinical samples and laboratory and to provide with PPE supplies. It also includes the design and implementation of screening and surveillance strategies addressing issues associated with pandemics. In addition, the interest of the Government of the PBA in the specific local development of technologies and reagents at the University is the focus of another recently signed tripartite agreement that includes R&D institutes of the UNLP also associated with CONICET (Argentinean National Research Council).Desde que se informó el primer caso de enfermedad por COVID-19 en China, en diciembre de 2019, y se declaró la crisis sanitaria y luego la pandemia, los sistemas de Salud debieron adaptar sus estructuras para realizar diagnóstico, vigilancia, monitoreo de la respuesta inmune y evaluación de la protección inmune post-infección o post-vacunación. En este escenario el Grupo COVID Exactas, a través del Laboratorio de Salud Pública, de la Secretaría de Extensión de la Facultad de Ciencias Exactas, montó un laboratorio de diagnóstico para realizar la detección del RNA viral en muestras de pacientes mediante su amplificación RT-qPCR. Para paliar la falta de disponibilidad de reactivos y simplificar la extracción del RNA se encaró el desarrollo de un sistema basado en nanopartículas magnéticas recubiertas de sílice, que no requieren el uso de centrifuga. Al mismo tiempo, el grupo Serología comenzó a monitorear anticuerpos séricos IgG específicos, mientras que el grupo Investigación comenzó a desarrollar inmunoensayos para detección de IgG/IgM/IgA específicos y caracterización de espectros infrarrojo y fluorescente en muestras de orina. En este contexto de gravedad sanitaria la UNLP y el Ministerio de Salud de la Provincia de Buenos Aires (PBA) firmaron un convenio de cooperación y trabajaron en la adecuación de laboratorios, coordinación de distribución de muestras, provisión de reactivos e insumos y diseño de estrategias conjuntas de vigilancia para aportar soluciones al sistema de salud en el contexto de pandemia. Asimismo, el interés del Gobierno de la PBA por los desarrollos de los institutos de la UNLP y de doble dependencia UNLP-CONICET, dio lugar a otro convenio tripartito con finalidades específicas

The Major Soybean Allergen Gly m Bd 28K Induces Hypersensitivity Reactions in Mice Sensitized to Cow's Milk Proteins

Reactions to soy have been reported in a proportion of patients with IgE-mediated cow’s milk allergy (CMA). In this work, we analyzed if Gly m Bd 28K/P28, one of the major soybean allergens, is a cross-reactive allergen with cow milk proteins (CMP). We showed that P28 was recognized by IgE sera from CMA patients and activated human peripheral basophils degranulation. Moreover, IgE sera of mice exclusively sensitized to CMP recognized P28. Splenocytes from sensitized animals secreted IL-5 and IL-13 when incubated with CMP or soy proteins, but only IL-13 when treated with P28. In addition, a skin test was strongly positive for CMP and weakly positive for P28. Remarkably, milk-sensitized mice showed hypersensitivity symptoms following sublingual challenge with P28 or CMP. With the use of bioinformatics’ tools seven putative cross-reactive epitopes were identified. In conclusion, using in vitro and in vivo tests we demonstrated that P28 is a novel cross-reactive allergen with CMP.Fil: Candreva, Ángela María. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Smaldini, Paola Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Curciarello, Renata. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Fossati, Carlos Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Petruccelli, Silvana. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentin

ESTUDIO DE LA INMUNOBIOLOGÍA DE COMPONENTES INMUNES MUCOSALES INVOLUCRADOS EN LA FIBROSIS DE PATOLOGÍAS EOSINOFÍLICAS

La alergia alimentaria es un síndrome que puede presentarse bajo diferentes entidades clínicas, probablemente con distintos mecanismos inmunopatogénicos, lo cual determina que se trate de una patología muy heterogénea y variable. Las enfermedades eosinofílicas (colitis, esofagitis, enteritis, etc.) son patologías inducidas por la exposición a determinados alergenos alimentarios y se caracterizan por un marcado infiltrado celular inflamatorio dominado por eosinófilos. En estas patologías el tracto gastrointestinal se encuentra afectado por un proceso inflamatorio, desencadenado principalmente por algunos alimentos. Como consecuencia, la función de barrera inmune se ve afectada y eso da lugar a una mayor probabilidad de lesiones en el compartimento epitelial (mediadas por la presencia de microorganismos, alergenos o cualquier otro antígeno o agente irritante) que promueven un aumento en la producción de citoquinas pro-inflamatorias en la mucosa intestinal. Si bien se desconoce la etiología de las patologías eosinofílicas, se sabe por distintos estudios, que intervienen factores genéticos y ambientales, por lo cual se trata de enfermedades multifactoriales, que se manifiestan con síntomas muy consistentes tales como disfagia, reflujo gastro-esofágico, dolor abdominal, diarrea, obstrucción esofágica y hasta shock anafiláctico. Por lo tanto, en este proyecto proponemos ahondar en los mecanismos que determinan que estas patologías se manifiesten. Estudiaremos el rol de las células epiteliales y endoteliales del entorno inflamatorio alérgico que favorece la acumulación de eosinófilos y la activación de fibroblastos, en el inicio del proceso de fibrosis en colon y esófago. Para ello, contaremos con biopsias de pacientes con esofagitis eosinofílica y líneas celulares humanas de tipo epiteliales, endoteliales, fibroblastos y eosinófilos. Consideramos que los resultados que surjan de este proyecto permitirán alcanzar una mejor y más profunda comprensión de la patogénesis de las patologías eosinofílicas, que podrían representar una nueva manifestación de las alergias alimentarias. &nbsp

Contribution of non-immune cells to activation and modulation of the intestinal inflammation

The mucosal immune system constitutes a physical and dynamic barrier against foreign antigens and pathogens and exerts control mechanisms to maintain intestinal tolerance to the microbiota and food antigens. Chronic alterations of the intestinal homeostasis predispose to inflammatory diseases of the gastrointestinal tract, such as Inflammatory Bowel Diseases (IBD). There is growing evidence that the frequency and severity of these diseases are increasing worldwide, which may be probably due to changes in environmental factors. Several stromal and immune cells are involved in this delicate equilibrium that dictates homeostasis. In this review we aimed to summarize the role of epithelial cells and fibroblasts in the induction of mucosal inflammation in the context of IBD. It has been extensively described that environmental factors are key players in this process, and the microbiome of the gastrointestinal tract is currently being intensively investigated due to its profound impact the immune response. Recent findings have demonstrated the interplay between dietary and environmental components, the gut microbiome, and immune cells. “Western” dietary patterns, such as high caloric diets, and pollution can induce alterations in the gut microbiome that in turn affect the intestinal and systemic homeostasis. Here we summarize current knowledge on the influence of dietary components and air particulate matters on gut microbiome composition, and the impact on stromal and immune cells, with a particular focus on promoting local inflammation.Fil: Curciarello, Renata. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Canziani, Karina Eva. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Muglia, Cecilia Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas; Argentin

Chronic inflammation as a manifestation of defects in immunoregulatory networks: implications for novel therapies based on microbial products

Based on a unifying theory presented here, it is predicted that the immune defects resulting in chronic inflammation rather than effective immune responses could be rectified by the therapeutic use of agents prepared from micro-organisms. With appropriate molecular patterns, these should be able to induce protective immunoregulatory networks or to reprogramme defective ones. In contrast to acute inflammation, chronic inflammation appears to have no beneficial role, but is a state of sustained immune reactivity in the presence or progression of a disease process. This results in an escalating cycle of tissue damage followed by unproductive tissue repair, breaks in self-tolerance, malignant transformation or deleterious changes in tissue morphology and function. Such inappropriate immune reactivity is an underlying characteristic, either in initiation or maintenance, of a diverse range of disease states including chronic infection, autoimmunity, allergy, cancer, vascular disease and metabolic alterations. Evidence is presented that the inappropriate immune reactivity is due, at least to some extent, to failures in the establishment of immunoregulatory networks as a result of hygiene-related factors. Such networks are the result of activation of antigen-presenting cells, principally dendritic cells, by molecular patterns of micro-organisms encountered sequentially during life and establishing the "biography" of the immune system.Fil: Bottasso, Oscar Adelmo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Docena, Guillermo H.. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Stanford, J. L.. University College London; Estados UnidosFil: Grange, J. M.. University College London; Estados Unido

Protein Ingredients Control in Gluten Free Products Using SDS-PAGE, Developed Competitive Enzyme Immunoassays and Commercial ELISA Kits.

Some protein ingredients declared in the label of gluten free products are allergenic proteins (milk, soy and egg).The proper identification of these proteins in food products is important for consumers who have food allergies. The aim of this study was to control the presence of protein ingredients declared in the label of gluten free products. Samples were analyzed with sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), using an extractive solution of total proteins (Tris-ClH buffer 0.0625 M with 3% sodium dodecylsulfate and 2% 2-mercaptoethanol; pH: 6.8) and a selective solvent for the extraction of caseins (isopropanol 55° + 2-mercaptoethanol / ISO + ME). Developed Competitive enzyme immunoassays were used for the detection / quantification of milk, soy and egg proteins in products elaborated with rice flour. Specific polyclonal rabbit antiserums against milk, soy and egg proteins were used as primary antibodies in these competitive enzyme immunoassays. Commercial ELISA kits from Neogen, R-Biopharm and Romer were used to verify the results. In some samples undeclared allergens were detected. Correct allergens labeling is very important for the safety of allergic consumers. In conclusion, it is possible to identify all the proteins ingredients in these gluten-free foods studied, using a combination of electrophoretic methods and immunochemical methods.Fil: Cellerino, Karina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cagnasso, Carolina Elisa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Greco, Carola Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Polenta, Gustavo Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ferreyra, Marcela Verónica. Instituto Nacional de Tecnología Industrial; ArgentinaFil: Lopez, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Duodenal intraepithelial lymphocytes of children with cow milk allergy preferentially bind the glycan-binding protein galectin-3

A breakdown in intestinal homeostasis results in inflammatory bowel diseases including coeliac disease and allergy. Galectins, evolutionarily conserved beta-galactoside-binding proteins, can modulate immune-epithelial cell interactions by influencing immune cell fate and cytokine secretion. In this study we investigated the glycosylation signature, as well as the regulated expression of galectin-1 and -3 in human duodenal samples of allergic and non-allergic children. Whereas galectin-1 was predominantly localized in the epithelial compartment (epithelial cells and intraepithelial lymphocytes) and the underlying lamina propria (T cells, macrophages and plasma cells), galectin-3 was mainly expressed by crypt epithelial cells and macrophages in the lamina propria. Remarkably, expression of these galectins was not significantly altered in allergic versus non-allergic patients. Investigation of the glycophenotype of the duodenal inflammatory microenvironment revealed substantial alpha2-6-linked sialic acid bound to galactose in lamina propria plasma cells, macrophages and intraepithelial lymphocytes and significant levels of asialo core 1 O-glycans in CD68+ macrophages and enterocytes. Galectin-1 preferentially bound to neutrophils, plasma cells and enterocytes, while galectin-3 binding sites were mainly distributed on macrophages and intraepithelial lymphocytes. Notably, galectin-3, but not galectin-1 binding, was substantially increased in intraepithelial gut lymphocytes of allergic patients compared to non-allergic subjects, suggesting a potential role of galectin-3-glycan interactions in shaping epithelial-immune cell connections during allergic inflammatory processes.Fil: Mercer, Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de La Plata; ArgentinaFil: Guzman, Luciana. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital de Niños "Sor María Ludovica" de la Plata; ArgentinaFil: Cueto Rua, Eduardo. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital de Niños "Sor María Ludovica" de la Plata; ArgentinaFil: Drut, Ricardo. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital de Niños "Sor María Ludovica" de la Plata; ArgentinaFil: Ahmed, H.. University of Maryland; Estados UnidosFil: Vasta, G. R.. University of Maryland; Estados UnidosFil: Toscano, Marta Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Rabinovich, Gabriel Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de La Plata; Argentin

Pathogenesis and treatments in Inflamatory Bowel Disease

Las enfermedades inflamatorias gastrointestinales son patologías inflamatorias crónicas que presentan una patofisiología multifactorial y su etiología es poco conocida. Si bien se trata de un conjunto de desórdenes que afectan el tracto gastrointestinal, los más conocidos y caracterizados son la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa. No se conoce exactamente la patogénesis de las mismas, pero tienen en común que el proceso inflamatorio es consecuencia de una activación sostenida del sistema inmune asociado a la mucosa gastrointestinal, con la participación de células de la inmunidad innata y de la inmunidad adaptativa, básicamente linfocitos Th1 y Th17. En estas patologías se observa la alternancia de períodos de actividad inflamatoria o recaída y de remisión, desconociéndose las causas de este fenómeno. La mejor comprensión de este proceso es imprescindible para el desarrollo de nuevas terapias que permitan controlar la inflamación y el daño tisular, y restituir la homeostasis intestinal. Las terapias biológicas constituyen terapias emergentes, algunas de las cuales han mostrado ser altamente efectivas. Sin embargo, el alto porcentaje de pacientes no respondedores determina que se deban profundizar los estudios para desarrollar tratamientos más eficaces.Inflammatory bowel diseases are multifactorial and chronic inflammatory disorders with a partially unknown etiology. These pathologies comprise two welldefined diseases that mainly affect the gastrointestinal tract: the Crohn´s disease and Ulcerative colitis, among others. Although the pathogenic mechanisms have been thoroughly described, its origin is unknown. It is well characterized that the immune system associated with the gut is activated, and the sustained inflammation promotes the damage in the tissues. Immune cells from the innate (neutrophils, macrophages and eosinophils) and adaptive (B and T lymphocytes-Th1 and Th17) effector immune arms are involved. It is a relapsing condition in which alternating periods of activation and remission are observed, and the underlying mechanisms are not understood. For the development of novel and promising therapies that reverse the inflammation and restore homeostasis, new insights on the immunopathogenic mechanisms should be unveiled. Biologics are widely used, and they have shown a high efficacy. Nevertheless, a high percentage of patients become non-responders, and hence new treatments should be developed.Fil: Curciarello, Renata. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Muglia, Cecilia Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Chavero, Paula. Hospital Italiano de La Plata; ArgentinaFil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas; Argentin

ANÁLISIS DE LAS PROPIEDADES ANTI-INFLAMATORIAS DE PÉPTIDOS DE AMARANTO Y FORMULACIÓN DE ALIMENTOS FUNCIONALES

Análisis de las propiedades anti-inflamatorias de péptidos de amaranto y formulación de alimentos funcionales Objetivo general. El objetivo general es dilucidar los mecanismos que median las propiedades anti-inflamatorias que ejercen péptidos de amaranto y su empleo en la formulación de alimentos funcionales. Antecedentes. Durante las últimas décadas se ha observado un importante incremento en la incidencia de inmunopatologías inflamatorias que se asocia a marcados cambios en el estilo de vida, principalmente en países industrializados o desarrollados. En los últimos años se está investigando el efecto que diferentes alimentos tienen sobre la microbiota y consecuentemente, sobre los mecanismos regulatorios mucosales ya que, la disbiosis genera una mayor incidencia de inmunopatologías inflamatorias. El amaranto es considerado uno de los vegetales con mayor potencial alimenticio para el hombre, debido a su composición nutricional, principalmente por la riqueza en minerales y proteínas. Aquí estudiaremos el efecto que componentes de amaranto ejercen sobre diferentes procesos inflamatorios intestinales empleando diferentes modelos experimentales de inflamación intestinal. Entre las patologías inflamatorias que afectan al intestino se encuentran las alergias alimentarias (AA), las enfermedades inflamatorias intestinales (EII) (enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa) y el cáncer colorrectal (CCR). Dada la alta morbi-mortalidad de estas enfermedades, el estudio de estrategias terapéuticas o preventivas resulta fundamental para mejorar la calidad de vida de los pacientes. El empleo de modelos animales resulta de gran utilidad como herramientas biológicas pre-clínicas para el desarrollo de inmunoterapias mucosales. Actividades y metología experimental. Caracterización in vivo de un alimento funcional. Se emplearán diferentes modelos experimentales de inflamación intestinal en ratón, que involucran a la vía NF-kB. 1- Modelo murino de alergia alimentaria 2- Modelo murino de colitis 3- Modelo murino de cáncer colorrectal Dentro de cada modelo, se encontrarán grupos control y grupos a los que se les administrará el alimento funcional. En los mismos, se evaluarán distintos parámetros que permitan poner en evidencia el efecto anti-inflamatorio del amaranto como: signos clínicos, daño intestinal microscópico a través de histología, caracterización de poblaciones celulares por citometría de flujo, expresión y secreción de citoquinas pro-inflamatorias por qPCR y ELISA, respectivamente. A su vez, en el modelo de alergia alimentaria, se evaluarán niveles plasmáticos de histamina y se realizarán pruebas cutáneas. Se espera observar una mejora en los signos clínicos y en el daño epitelial a nivel del intestino así como una disminución en la expresión y secreción de citoquinas proinflamatorias, también una disminución en la producción de histamina y negativización de la prueba cutánea en el modelo de alergia, en los grupos que recibieron el alimento funcional

Mucosal Immunoregulatory Properties of Tsukamurella inchonensis to Reverse Experimental Food Allergy

The intestinal mucosa is lined by epithelial cells, which are key cells to sustain gut homeostasis. Food allergy is an immune-mediated adverse reaction to food, likely due to defective regulatory circuits. Tsukamurella inchonensis is a non-pathogenic bacterium with immunomodulatory properties. We hypothesize that the anti-inflammatory effect of dead T. inchonensis on activated epithelial cells modulates milk allergy through the restoration of tolerance in a mouse model. Epithelial cells (Caco-2 and enterocytes from mouse gut) and macrophages were stimulated with T. inchonensis and induction of luciferase under the NF-κB promoter, ROS and cytokines production were studied. Balb/c mice were mucosally sensitized with cow´s milk proteins plus cholera toxin and orally challenged with the allergen to evidence hypersensitivity symptoms. After that, mice were orally administered with heat-killed T. inchonensis as treatment and then challenged with the allergen. The therapeutic efficacy was in vivo (clinical score and cutaneous test) and in vitro (serum specific antibodies and cytokines-ELISA, and cell analysis-flow cytometry) evaluated. Heat-killed T. inchonensis modulated the induction of pro-inflammatory chemokines, with an increase in anti-inflammatory cytokines by intestinal epithelial cells and by macrophages with decreased OX40L expression. In vivo, oral administration of T. inchonensis increased the frequency of lamina propria CD4+CD25+FoxP3+ T cells, and clinical signs were lower in T. inchonensis-treated mice compared with milk-sensitized animals. In vivo depletion of Tregs (anti-CD25) abrogated T. inchonensis immunomodulation. In conclusion, these bacteria suppressed the intestinal inflammatory immune response to reverse food allergy.Fil: Smaldini, Paola Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Trejo, Fernando Miguel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Rizzo, Gaston Pascual. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Comerci, Diego José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Kampinga, Jaap. Actinopharma Ltd.; Reino UnidoFil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentin